微生物不同的生理狀態對存活率有影響，一般使用靜止期或成熟期培養物。液氮罐廠家小編建議在分裝時注意應在無菌條件下操作。

菌種的準備可采用下列幾種方法：

刮取培養物斜面上的孢子或菌體，與保護劑混勻后加入凍存管內;

接種液體培養基，振蕩培養后取菌懸液與保護劑混合分裝于凍存管內;

將培養物在平皿培養，形成菌落后，用無菌打孔器從平板上切取一些大小均勻的小塊(直徑約5 mm～10 mm)，真菌*好取菌落邊緣的菌塊，與保護劑混勻后加入凍存管內;

在小安瓿管中裝(1.2～2) mL的瓊脂培養基，接種菌種，培養2 d～10 d后，加入保護劑，待保藏。